迴旋振盪器振盪
轉印完成後，將 NC paper 置於3﹪Blot-Quick blocking solution 中，用迴旋振盪器振盪三十分鐘 blocking。
-
00:00
1.
Western Blot - Semi-Dry transfer [Video from GeneTex]
播放影片: http://lab.formosasoft.com/media/137
重點
- 1.
- 2.加入 COX-2 與 nNOS antibody加入初級抗體，用迴旋振盪器振盪作用二至三小時。
- 3.再次反應以 TTBS (Tris-Tween buffer saline) 強力振盪洗三次，每次八分鐘。再將 transfer membrane 置於3﹪Blot-Quick blocking solution 中，用迴旋振盪器振盪三十分鐘 blocking。再加入次級抗體 (1：500 polyclonal anti-rabbit IgG for COX-2，monoclonal anti-mouse IgG for nNOS)，作用50分鐘。
- 4.強力振盪以 TTBS 強力振盪洗三次，每次八分鐘。
- 5.蔭乾 ~ 反應將 transfer membrane 夾起蔭乾，置入 chemiluminescence reagents（PerkinElmer Life Science；Western Lightning: Enhanced luminol reagent 1.5ml 配上Oxidizing reagent 1.5ml）作用 3 分鐘反應螢光。
- 6.觀察最後以 Kodak 之 X-ray 壓片，洗片後觀察結果。
- (僅模擬資料，資料來源: http://p5a2u2l6.pixnet.net/blog/post/30322139)
檢核清單
- 位置
-
- 資料夾名稱
- western blot (西方點漬法)
- 發表人
- 系統管理者
- 單位
- 台灣數位學習科技
- 建立
- 2018-12-18 09:16:05
- 最近修訂
- 2018-12-18 14:59:46
- 長度
- 05:06
- 引用
- 1
- 來源
- https://www.youtube.com/watch?v=krFKPwhiHJE&list=PL9MMxtqzXYVLy74oC1BiAIiRuNLDCd43u