Western Blot - Electrophoresis | tms+ 知識 / 訓練

Western Blot - Electrophoresis

Duration: 06:36, Browse: 2271, Last Updated: 2018-12-18

Keypoint

1.

浸泡緩衝液
先將nitrocellulose（NC）paper（transfer membrane）及3M濾紙浸泡於轉印緩衝液（pH10.4，Transfer buffer：CAPS 2.2g、methanol 200ml、DDW 800ml）中，直到紙之各部分均勻潤濕為止。
2.

正負極
Electrotransfer 的方向是由負極 (anode) 到正極 (cathode)，而 NC paper 要置於接近正極，膠體那一面向負極。
3.

轉印
將已浸濕的 3M 濾紙，整齊重疊至於半乾式電轉漬器中間，為最底層。再平舖膠體於濾紙之上，並將 NC paper 蓋在膠體上，最上層再舖上 3M 濾紙，最後蓋上蓋子。接上電源，維持電流 130mA，轉印 overnight (至少14至15小時)
(僅模擬資料，資料來源: http://p5a2u2l6.pixnet.net/blog/post/30322139)